GST下拉实验GST-pull down assay

    蛋白互作:GST下拉实验(GST-pull down assay)

    2023/6/7     浏览次数:    

    ▲ GST下拉实验(GST-pull down)技术原理示意图


    GST下拉实验原理简介

      GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术,,,可用来进一步验证酵母双杂交的结果。。。将靶蛋白与 GST(谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase)融合,,,,使其与谷胱甘肽亲和树脂结合,,,,然后在目的蛋白溶液过柱时,,,便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白,,洗脱结合物后通过western blot分析,,,即可证实两种蛋白间的相互作用或筛选与之互作的蛋白。。。


    GST下拉实验流程

      ①构建表达载体:目的基因克隆或目的基因合成;限制性内切酶酶切骨架载体并纯化;目的基因插入骨架载体;转化大肠杆菌,,筛选阳性克隆并测序鉴定;
      ②转化表达菌株:将目的表达载体转化表达菌株;
      ③制备目的蛋白:诱导目的蛋白表达并提取目的蛋白;
      ④GST-pull down实验;
      ⑤Western Blot检测目的蛋白;
      ⑥拍照记录实验结果。。。。


    GST-pull down实验流程图


    GST下拉实验结果展示



      GST下拉实验技术服务范畴:验证两个已知蛋白质间的相互作用
      技术服务优势:
      ①团队经验丰富;
      ②交付周期短,,,提供原始图片,,,,保证数据真实可靠。。。。

    返回上一步
    打印此页
    155-5696-9382
    浏览手机站
    微信二维码
    公众号
    站点地图